一、實驗目的
1、學習小白鼠學習記憶行為檢測方法
2、學習小鼠避暗自動測試儀的使用方法。
3. 了解影響學習記憶功能的一些因素。
二、實驗原理
嚙齒類動物系夜行性動物,喜歡黑暗的地方,而回避光亮之地。它將設法逃向暗處,此時在暗處給予其電刺激,小鼠會被迫逃回明亮處,并獲得記憶。根據(jù)此原理設計的實驗為一次性被動回避反應實驗。
被動回避反應(Passive Avoidance Response)為二十世紀60年代后期發(fā)展起來的、普遍用于檢測小動物學習記憶能力的一種動物模型。反應特征:動物必須學會躲避可怕的事件,而抑制其天然本性。被動回避反應有:避暗法(又稱步入法step-through test)、跳臺法(又稱步下法step-down test)等。
三、實驗器材
小白鼠常用手術器械、亞**鈉、東莨菪堿(scopolamine,Scop.)、生理鹽水、35 %酒精。(廠家:北京智鼠多寶生物公司))
四、實驗步驟
1. 實驗 儀器
北京智鼠多寶生物科技發(fā)展有限責任公司小鼠避暗自動測試儀由控制器和活動箱兩部分組成,可同時對6只小鼠進行實驗。明暗實驗箱之間有一小門供動物進出,當動物進入暗室被電擊時,它可自動記錄小鼠**次從明室進入暗室的潛伏期和受到電擊的次數(shù),還可通過按鍵靈活地選擇刺激電壓和設置實驗時間。
2. 實驗程序:
2.1適應:將動物頭朝室壁放入明室,兩室之間的門洞敞開,讓動物在兩室內自由活動2-3分鐘,取出后放回飼養(yǎng)籠。
2.2訓練:**天, 將動物放入明室, 它很快鉆入暗室, 連接兩室的門洞關閉,同時啟動電刺激器, 動物足部受電擊。如果動物在**次訓練時超過100秒不進暗室, 淘汰之或用手把它輕輕趕進暗室。
記錄指標:
(1)記錄動物自明室進入暗室的潛伏期,可作為判斷給藥后動物行為是否有變的一個指標。若**致使動物**,則潛伏期顯著長于對照組。
(2)記錄動物受到電擊后的反應,如劇烈嘶叫并跳躍,評為A級反應;微弱尖叫,評為B級反應;不叫,評為C級反應。受到電擊后動物一般均跳躍。C級反應常伴動物跳躍,動物雖不尖叫,但正常動物均能感受電擊疼痛,顯示好的記憶成績。C級反應多見于雄性動物。A級反應多見于雌性動物。該記錄可作為動物痛域是否變化的一個輔助觀察指標。
2.3重測試:訓練后24小時(第三天),再次將動物放入明室,進行重測試。
記錄指標:
(1)記錄動物進入暗室的潛伏期,為步入潛伏期(step through latency, STL)。*大潛伏期設為300秒。
(2)記錄動物300秒內進入暗室的錯誤次數(shù),包括**次錯誤進入暗室的次數(shù)。
實驗設計舉例
按照信息論將記憶簡單劃分為:記憶的獲得(也即學習過程、信息的獲得過程)、記憶的鞏固(信息的保持過程)、記憶的再現(xiàn)(信息的提取過程)時,我們可依此來篩選作用于記憶不同階段的認知**。
在訓練前、后或重測前給損傷動物記憶的**,可分別觀察該**對記憶不同階段的影響,在此之前給動物待檢測認知**,即可依據(jù)實驗結果判斷該認知**對抗損傷**的效果。為簡化篩選工作,常選用實驗步驟較少的小動物學習記憶測試方法,現(xiàn)以步入法為例說明如下。